Real Time PCR研究進展及其在海洋病原生物 檢測中的應用

通常熒光擴增曲線可以分成四個階段：熒光背景信號階段，熒光信號指數擴增階段，線性增長期和平臺期(圖1)。在PCR反應早期，即熒光背景信號階段，產生熒光的水平不能與背景明顯地區別，無法判斷產物量的變化，而后熒光的產生進入指數期、線性期和最終的平臺期。在平臺期，擴增產物已不再呈指數級的增加，而且PCR的終產物量與起始模板量之間沒有線性關系，所以根據最終的PCR產物量不能計算出起始DNA拷貝數。只有在熒光信號指數擴增階段，PCR產物量的對數值與起始模板量之問存在線性關系，因此可以在PCR反應處于指數期的某一點上來檢測PCR產物的量，并且由此來推斷起始模板的量。